大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于引物稀释的问题,于是小编就整理了5个相关介绍引物稀释的解答,让我们一起看看吧。
引物稀释倍数是什么?
大写的M= mol/L,因此1 uM= 10^6pM.但是实验室中用来PCR的引物,我们常说的皮mol是指其物质量,或者说是已pmol/ul为单位的.因此 1uM = 1 pmol/ul因此引物管上标明的100uM,稀释到10 pmol/ul,也就是10uM,就是稀释10倍啦
引物稀释后能保存多久?在什么温度保存合适?谢谢?
如果是gDNA的话 在负二十度放两三个月问题不大,如果自己反转得到的cDNA,那就不能放很久了,最多也就是一个月的,当然我师兄拿出来两个月的模板照样PCR,只是要确认你的目的模板含量是不是比较高。
引物的话,干粉放负二十度保存的时间最久,如果是稀释成母液,保存半年是没问题的。对于使用浓度的引物,我一般放四度,一到两个月更换一次。反复冻融也不好
pcr引物浓度?
>>> 一般都稀释成应用液,常用浓度是10uM/L也就是10pM/L.这样的话,20ul体系加1ul,50ul体系加2ul,方便使用!至于引物会不会降解的问题,估计高浓度比低浓度保存时间长说法是对的。但是,通常引物在20度放半年都没有问题,如果不是经常用,可以先取出一部分来用,其余都放-80度保存,可以放很久。 引物稀释很简单,一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nM,你直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了 ,在加水之前要先高速离心管子几分钟,加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了。
引物干粉加水溶解多久?
1分钟。
收到引物后,在开启离心管盖前在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟,以防开盖时引物干粉散失.引物保存在高浓度的状况下比较稳定.如果对实验的重复性要求较高,合成的OD数较大,建议分装,避免反复冻融.引物一般配制成10-100pmol/uL(umol/L).
引物管上标有1OD 相当于多少umol 的计算结果,进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算:
稀释成100pmol/ul 1OD 需加水量(ul)=1OD相当于umol 数×10000
pcr反应体系水加多了影响大吗?
比较大。
以下是可能的影响:
1. 稀释模板DNA:PCR反应体系中的DNA浓度是PCR反应进行的关键。如果加入的水过多,PCR反应中的DNA浓度会被稀释,从而降低PCR反应的灵敏度。
2. 影响反应缓冲液的浓度:PCR反应缓冲液的浓度是PCR反应进行的关键。如果加入的水过多,会稀释PCR反应缓冲液中的其他组分,如引物和酶,从而影响PCR反应的效率。
3. 影响反应体系的pH值:PCR反应的pH值是PCR反应进行的关键。如果加入的水过多,会稀释PCR反应中的缓冲液,从而影响反应体系的pH值,从而影响PCR反应的效率和特异性。
综上所述,加入过多的水会对PCR反应产生负面影响,因此在制备PCR反应体系时,应该严格控制加入的水的量。
PCR反应体系水加多了影响大吗?影响较大。
1. PCR反应体系中的水是反应物的溶剂和媒介之一。
如果水加多了,会影响反应液的浓度和平衡,影响PCR反应的效率和结果。
2. PCR反应的准确性和灵敏度取决于反应物的浓度。
如果水加多了,反应物的浓度会稀释,使得PCR反应的效果变差,可能导致阴性结果或者假阳性结果。
3. 此外,PCR反应的温度和时间调控也是非常重要的,如果水加多了,可能会导致反应液的温度和时间控制不准确,进一步影响PCR反应的结果。
综上所述,当PCR反应体系中的水加多了,会对PCR反应的效率、准确性和灵敏度产生较大的影响。
到此,以上就是小编对于引物稀释的问题就介绍到这了,希望介绍关于引物稀释的5点解答对大家有用。
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