首页 » 专业五金资讯百科 » 常见的dna提取方法及优缺点-常见的dna提取方法及优缺点有哪些

常见的dna提取方法及优缺点-常见的dna提取方法及优缺点有哪些

xinfeng335 2023-11-26 专业五金资讯百科 25 views 0

扫一扫用手机浏览

文章目录 [+]

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于常见的dna提取方法及优缺点的问题,于是小编就整理了3个相关介绍常见的dna提取方法及优缺点的解答,让我们一起看看吧。

(图片来源网络,侵删)

盐析法提取dna的优缺点?

盐析法提取DNA原理DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解而使杂质沉淀或者相反以达到分离目的。

DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小,在DNA溶解度最低时DNA从溶液中析出,而其他杂质还留在溶液中达到粗提取的目的。

dna的提取方法?

DNA的提取方法有7种:酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻璃棒缠绕法、异丙醇沉淀法、表面活性剂快速制备法、加热法快速制备、碱变性快速制备。

DNA的提取原则

1、保证核酸一级结构的完整性;

2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;

3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;

4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。

如何提取DNA?

DNA提取的几种方法 

(1).浓盐法 

利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来. 

也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白. 

两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些. 

以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA. 

(2).阴离子去污剂法: 

用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA. 

(3).苯酚抽提法: 

苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 . 

( 4).水抽提法: 

利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

到此,以上就是小编对于常见的dna提取方法及优缺点的问题就介绍到这了,希望介绍关于常见的dna提取方法及优缺点的3点解答对大家有用。

标签:

本文转载自互联网,如有侵权,联系删除

本文链接地址:http://ideahousetour.com/post/3820.html

最后编辑于:2023/11/26作者:xinfeng335

相关文章

微波提取-微波提取法

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微波提取的问题,于是小编就整理了2个相关介绍微波提取的解答,让我们一起看看吧。...

专业五金资讯百科 2024-01-16 阅读22 评论0

胡萝卜素的提取-胡萝卜素的提取实验

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于胡萝卜素的提取的问题,于是小编就整理了3个相关介绍胡萝卜素的提取的解答,让我们...

专业五金资讯百科 2024-01-15 阅读24 评论0

索式提取器-索式提取器的工作原理及优点

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于索式提取器的问题,于是小编就整理了4个相关介绍索式提取器的解答,让我们一起看看...

专业五金资讯百科 2024-01-15 阅读26 评论0

索氏提取器-索氏提取器装置图

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于索氏提取器的问题,于是小编就整理了4个相关介绍索氏提取器的解答,让我们一起看看...

专业五金资讯百科 2024-01-14 阅读25 评论0

dna提取-dna提取方法

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于dna提取的问题,于是小编就整理了2个相关介绍dna提取的解答,让我们一起看看...

专业五金资讯百科 2024-01-12 阅读34 评论0

豆柏-

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于豆柏的问题,于是小编就整理了5个相关介绍豆柏的解答,让我们一起看看吧。(图片来...

专业五金资讯百科 2024-01-07 阅读30 评论0