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dna提取-dna提取方法

xinfeng335 2024-01-12 专业五金资讯百科 31 views 0

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于dna提取的问题,于是小编就整理了2个相关介绍dna提取的解答,让我们一起看看吧。

(图片来源网络,侵删)

如何提取人类dna?

DNA提取的方法有很多种,包括物理法和化学法。以下是其中一种方法:

收集材料:从人体中收集DNA的材料,如血液、口腔黏膜细胞等。

清洗和干燥:将材料用清水冲洗干净,然后用吸水纸将材料表面的水分擦干。

研磨:将材料放入研钵中,加入适量的液氮研磨至粉末状。

提取DNA:将研磨后的样品倒入试管中,加入适量的DNA提取试剂(如CTAB),然后轻轻摇晃试管,让DNA与试剂充分混合。

离心处理:将试管放入离心机中,设置适当的转速和时间进行离心处理。

洗涤和干燥:取出离心后的试管,将其中的液体倒掉,并用吸水纸将试管内部的水分擦干。重复步骤3-5,直到获得足够量的DNA。

检测DNA质量:使用DNA检测试剂盒(如琼脂糖凝胶电泳)对提取的DNA进行质量检测,确保其纯度和完整性符合要求。

需要注意的是,提取人类DNA需要严格遵守相关法律法规和技术规范,并且需要具备相应的资质和经验。因此,在进行DNA提取前,应该咨询专业机构或医生,以确保操作合法安全。

提取人类DNA的基本步骤包括:收集细胞样本,裂解细胞以释放DNA,使用蛋白酶K消化蛋白质,使用盐析法沉淀DNA,使用乙醇洗涤DNA,溶解DNA并进行纯化。

在裂解细胞和沉淀DNA的步骤中,需要使用专用的裂解缓冲液和沉淀缓冲液,以确保DNA的完整性。

在纯化DNA的步骤中,可以使用离心、柱层析或其他方法去除杂质,得到纯净的DNA样品。

提取人类DNA的过程通常在实验室中进行,需要一系列专业的设备和试剂。以下是提取人类DNA的基本步骤:
细胞分离:首先,从人体组织中分离出细胞。这通常是从血液、口腔拭子或培养的细胞系中进行的。
细胞溶解:然后,使用化学试剂和酶使细胞溶解,释放出其内部的DNA。
DNA纯化:接下来,通过一系列的离心、洗涤和漂洗步骤,去除与DNA结合的蛋白质和其他杂质。
DNA浓缩:经过纯化后,DNA通常会被浓缩或干燥,以便进行后续的分析或储存。
DNA检测:最后,可以使用各种技术检测和鉴定DNA。这些技术包括凝胶电泳、PCR扩增和测序等。
需要注意的是,提取DNA的过程需要严格遵守伦理和法律的规定,确保人的隐私和尊严得到尊重。在医学、遗传学或法医学研究中提取人类DNA时,通常需要获得当事人的知情同意,并遵循严格的伦理审查程序。

DNA怎么提取?

DNA提取的几种方法

(1).浓盐法

利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.

也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.

两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.

以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

(2).阴离子去污剂法:

用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.

(3).苯酚抽提法:

苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

( 4).水抽提法:

利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

到此,以上就是小编对于dna提取的问题就介绍到这了,希望介绍关于dna提取的2点解答对大家有用。

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最后编辑于:2024/01/12作者:xinfeng335

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