特异荧光染料-sybr green荧光染料

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于特异荧光染料的问题，于是小编就整理了3个相关介绍特异荧光染料的解答，让我们一起看看吧。

dna荧光染料发光原理？

荧光是物质吸收光照或者其他电磁辐射后发出的光。大多数情况下，发光波长比吸收波长较长，能量更低。但是当吸收强度较大时，可能发生双光子吸收现象，导致辐射波长短于吸收波长的情况发生。当辐射波长与吸收波长相等时，即是共振荧光。

常见的例子是物质吸收紫外光，发出可见波段荧光，我们生活中的荧光灯就是这个原理，涂覆在灯管的荧光粉吸收灯管中汞蒸气发射的紫外光，而后由荧光粉发出可见光，实现人眼可见。

扩展资料：

许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：

1、异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。其主要优点是：人眼对黄绿色较为敏感；通常切片标本中的绿色荧光少于红色。

2、四乙基罗丹明（RB200）：为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。

3、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）：最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。

4、藻红蛋白（R-RE）：本品为无定形，褐红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮，性质稳定，可长期保存。最大吸引光波长为565nm，最大发射光波长为578nm，呈明亮的橙色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，故被广泛用于对比染色或用于两种不同颜色的荧光抗体的双重染色。

荧光染料技术也称为DNA交联荧光染料技术。目前主要应用的染料分子是SYBR Green I, SYBR Green I是一种可以非特异地结合双链DNA小沟的荧光染料，它嵌合进 DNA双链，但不结合单链。

在PCR反应体系中加入过量SYBRGreen I染料，游离的过量 SYBR Green I染料几乎没有荧光信号，但当该染料能选择性地掺入至双链DNA分子中， 将会产生很强的荧光信号。

在PCR扩增过程中，由于新合成的双链DNA不断增加，SYBR Green I染料结合到双链DNA分子中也增加，因此，PCR扩增。

rt-pcr荧光染料有哪些？

分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB（溴化乙锭,高致癌性）,goldview,sybr green（实时定量PCR时常用染料）.这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色

荧光pcr技术的基本原理和过程？

基本原理:

荧光PCR技术，是指在普通PCR技术的基础上，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

主要有两种方法及过程：

1、SYBR Green 染料法

SYBR能够结合到双链DNA上面，当系统中的模板被扩增时，SYBR能够有用结合到新组成的双链上面，跟着PCR的进行，结合的SYBR燃料越来越多，被仪器检测到的荧光信号越来越强，然后到达定量的意图。在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

2、TaqMan探针法：

PCR扩增时在参加一对引物的一起参加一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两头分别标记一个陈述荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，陈述基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA恣意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使陈述荧光基团和淬灭荧光基团别离，然后荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，完成了荧光信号的累积与PCR产品形成彻底同步。

到此，以上就是小编对于特异荧光染料的问题就介绍到这了，希望介绍关于特异荧光染料的3点解答对大家有用。