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荧光相关光谱-荧光相关光谱fcs原理

xinfeng335 2024-11-15 专业五金资讯百科 103 views 0

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于荧光相关光谱的问题,于是小编就整理了3个相关介绍荧光相关光谱的解答,让我们一起看看吧。

(图片来源网络,侵删)

为什么荧光光谱的灵敏度要高于吸收和发射光谱?

在吸收光谱中,检测器无法测定光的绝对强度,只能比较两束光的相对强弱(所以测吸收总是需要一个空白样作为参比)。

荧光光谱的检测器可以检测光线的绝对强度。而且光源波长和检测器工作波长是不同的(荧光发射波长总是大于激发波长),同时检测器与光源垂直以避免干扰。所以荧光光谱的特点是几乎零背景。如果样品没有荧光,那么信号为0,如果有荧光,就会被检测到。检出限完全取决于检测器的底噪和灵敏度。而目前检测器已经能做得非常灵敏了,有些甚至能检测到单个光子。

拉曼光谱和荧光光谱的主要差异是什么?

简单来说,拉曼就是光散射后发生的频率改变; 荧光则是分子吸收能量再由于碰撞释放能量产生的。

荧光光谱:当物质分子吸收了特征频率的光子,就由原来的基态能级跃迁至电子激发态的各个不同振动能级.激发态分子经与周围分子撞击而消耗了部分能量,迅速下降至第一电子激发态的最低振动能级,并停留约10-9秒之后,直接以光的形式释放出多余的能量,下降至电子基态的各个不同振动能级,此时所发射的光即是荧光。产生荧光的第一个必要条件是该物质的分子必须具有能吸收激发光的结构,通常是共轭双键结构;第二个条件是该分子必须具有一定程度的荧光效率,即荧光物质吸光后所发射的荧光量子数与吸收的激发光的量子数的比值.使激发光的波长和强度保持不变,而让荧光物质所发出的荧光通过发射单色器照射于检测器上,亦即进行扫描,以荧光波长为横坐标,以荧光强度为纵坐标作图,即为荧光光谱,又称荧光发射光谱。让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光,而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上,然后以激发光波长为横坐标,以荧光强度为纵坐标所绘制的图,即为荧光激发光谱.荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关。拉曼光谱:当激发光的光子与作为散射中心的分子相互作用时,大部分光子只是发生改变方向的散射,而光的频率并没有改变,大约有占总散射光的10-10~10-6的散射,不仅改变了传播方向,也改变了频率.这种频率变化了的散射就称为拉曼散射.对于拉曼散射来说,分子由基态E0被激发至振动激发态E1。光子失去的能量与分子得到的能量相等为△E。不同的化学键或基团有不同的振动能级,△E反映了指定能级的变化。因此,与之相对应的光子频率变化也是具有特征性的,根据光子频率变化就可以判断出分子中所含有的化学键或基团。

氢化物发生原子荧光光谱法与氢化物原子吸收光谱法是一回事吗?

肯定不是一回事呀!首先,原子吸收光谱是基于气态的基态原子外层电子对紫外光和可见光范围的相对应原子共振辐射线的吸收强度来定量被测元素含量为基础的分析方法,是一种测量特定气态原子对光辐射的吸收的方法。

而原子荧光光谱是基于基态原子吸收特定波长光辐射的能量而被激发至高能态,受激原子在去激发过程中发射出的一定波长的光辐射的原理制成的可以检测元素,而所谓的氢化物发生法则是到气态原子的方法,就比如SK-乐析氢化物发生原子荧光光谱仪来说,它介于发射光谱和吸收光谱,因为在一般情况下很难得到被测元素的基态原子基态,而采用HG(氢化物发生)与AFS结合来解决这一难题。所以说氢化物发生原子荧光光谱法与氢化物原子吸收光谱法在从原理上讲是不同的,唯一的相同点就是都采用了HG。

到此,以上就是小编对于荧光相关光谱的问题就介绍到这了,希望介绍关于荧光相关光谱的3点解答对大家有用。

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最后编辑于:2024/11/15作者:xinfeng335

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