大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于核酸分子杂交的问题,于是小编就整理了4个相关介绍核酸分子杂交的解答,让我们一起看看吧。
aso探针杂交技术的检测原理?
基因探针的原理:
基因探针即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:
应带有容易被检测的标记。
它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。
基因探针的本质:
基因探针的本质是一段核酸序列(DNA或RNA)。
基因探针一般包括DNA探针和RNA探针两种。
基因探针的核苷酸顺序是已知的,与目的基因互补。一般用同位素或荧光标记。
DNA分子作探针进行检测时应检测单链,即应将双链DNA分子打开。
基因探针的来源:
DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针;另一种是从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针。与基因组探针不同的是,cDNA探针不含有内含子序列。此外,还可在体外人工合成碱基数不多的与基因序列互补的DNA片段,称为寡核苷酸探针。
什么叫DNA分子杂交技术?
互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针对已知序列进行特异性的靶序列检测。
杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的,也可以在细胞内杂交, 即细胞原位杂交。探针必须经过标记,以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素, 但由于同位素的安全性,近年来发展了许多非同位素标记探针的方法,例如,使用荧光分子。
核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性,因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 利用DNA探针还可以用于环境监测,如检测饮用水中病毒的含量。此法更快速、灵敏。
核酸分子的碱基配对规律是?
核酸包括DNA和RNA。
若DNA的***配对规律为A一T、C一G、T一A、G一C。
若DNA的转录配对规律为A一U、T一A、C一G、G一C。
若是翻译配对规律为A一U、U一A、C一G、G一C。
若为逆转录配对原則为A一T、U一A、C一G、G一C。
若为RNA的***配对原則为A一U、U一A、C一G、G一C。
原仁杂交技术是什么意思?
原位杂交技术是一种分子生物学技术,用于研究基因RNA或DNA的定位。它利用特定标记的核酸探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程1。原位杂交技术的基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双键分子的特点。
应用带有标记的DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位1。
到此,以上就是小编对于核酸分子杂交的问题就介绍到这了,希望介绍关于核酸分子杂交的4点解答对大家有用。
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