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水平电泳槽-水平电泳槽的使用方法

xinfeng335 2024-11-15 专业五金资讯百科 131 views 0

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于水平电泳槽的问题,于是小编就整理了4个相关介绍水平电泳槽的解答,让我们一起看看吧。

(图片来源网络,侵删)

dyy-10电泳仪可以跑水平电泳吗?

是的,DYY-10电泳仪可以跑水平电泳。水平电泳是一种常见的电泳技术,用于分离和分析DNA、RNA和蛋白质等生物分子。DYY-10电泳仪具有适用于水平电泳的设计和功能,包括水平电泳槽、电极和电源等。它能够提供稳定的电场和恒定的电流,确保样品在凝胶中均匀迁移,从而实现有效的分离和分析。因此,DYY-10电泳仪是一种适用于水平电泳的可靠设备。

压槽的目的?

压槽就是电泳槽,电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分。

根据电泳的原理,凝胶都是放在两个缓冲腔之间,电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之间的接触可以是直接的液体接触,也可以间接通过凝胶条或滤纸条。

电泳槽分类

1)圆盘电泳槽:有上,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住。要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细。

2)垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在两块垂直放置的平行玻璃板中间。

3)水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同。一般包括电泳槽基座、冷却板和电极。

电泳实验中标准参照物是什么?

电泳实验中标准参照物是分子量标准参照物的凝胶条,配置如下:(1)加热溶解1g琼脂糖到72ml水中,然后冷却到60℃。

(2)当冷却到60℃左右时,在通风柜中加入1OmL 1OxMOPS电泳溶液和18mL 37%甲醛,开始灌制琼脂糖水平凝胶。

(3)在琼脂糖中设置梳子,然后让胶凝固,取出梳子,把琼脂糖-甲醛胶放到电泳槽,加入足够的1 x MOPS电泳溶液使得液面覆盖凝胶上方1 mm左右。

蛋白质电泳的原理及基本方法?

原理:

电泳是一种蛋白质和核酸分子的分离技术,它通过在凝胶中应用外加电场来将大分子物质沿其不同的尺寸或电荷性质拉开而分离,从而达到分离分析的目的。
电泳的原理是外加一个电场,使得悬浮于凝胶中的各种大分子物质受到电场的影响而沿着凝胶中不同尺寸或电荷性质的拉力而分离。由于大分子物质的电荷性质不同,因此会受到不同的拉力,从而产生不同的运动方向和速度,使得原本混在一起的各种大分子物质被拉开分离。
此外,电泳也可以用于精确测定大分子物质的量子量,即把不同浓度的样品进行电泳,然后观察其凝胶中的分布情况,最后计算出该样品的浓度。

基本方法:

(1)将蛋白质样品与5X样品缓冲液(20ul+5ul)在一个eppendorf 管中混合。放入100℃加热5-10min,离心取上清点样。

(2)将玻璃板、样品梳、Spacer用洗涤剂洗净,用ddH2O冲洗数次,再用乙醇擦拭,晾干。

(3)组装好玻璃板:固定玻璃板时,两边用力一定要均匀,防止夹坏玻璃板。

(4)按表格1,根据要检测的蛋白的分子大小,选择相应的分离胶浓度,按表格2的配方进行配制。配制过程要迅速,催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶。注胶过程最好一次性完成,避免产生气泡。

(5)向玻璃板间灌制分离胶,立即覆一层重蒸水,大约20 min后胶即可聚合。水封的目的是为了使分离胶上延平直,并排除气泡。 凝胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面。

(6)按表格3配制浓缩胶。

(7)将分离胶上层重蒸水倾去,滤纸吸干,灌制浓缩胶,插入样品梳。注意,样梳需一次平稳插入,梳口处不得有气泡,梳底需水平。

(8)装好电泳系统,加入电极缓冲液,将样品梳拔去,上样。上样前请确保锯齿孔内的气泡全部排出,否则会影响加样效果。另外,上样过程中注射器不可过低,以防刺破胶体,也不可过高,在样下沉时会发生扩散。 为避免边缘效应,最好选用中部的孔注样。

(9)稳压200V,溴酚蓝刚跑出分离胶时,停止电泳,约需45 min~1hr. 最后,小心的将胶剥离玻璃板,进行下一步实验。

到此,以上就是小编对于水平电泳槽的问题就介绍到这了,希望介绍关于水平电泳槽的4点解答对大家有用。

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最后编辑于:2024/11/15作者:xinfeng335

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