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组织培养瓶-组织培养瓶用塑料瓶还是玻璃瓶效果好

xinfeng335 2023-10-31 专业五金资讯百科 29 views 0

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于组织培养瓶的问题,于是小编就整理了2个相关介绍组织培养瓶的解答,让我们一起看看吧。

(图片来源网络,侵删)

鸡成纤维细胞制备原理?

用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。

实验材料 9 日龄鸡胚

试剂、试剂盒 70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基

仪器、耗材 无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布 Sorvall 离心机250 ml 离心管150 cm2 组织培养瓶

步骤

1. 将 10 只 9 日龄鸡胚有空气部分朝上放置,喷上 70% 乙醇。

2. 用无菌的解剖剪将鸡蛋的顶部打开,剪掉膜上蛋壳,使膜保持完整。用无菌镊子将膜取掉。其他鸡蛋亦重复相同操作。

3. 取出鸡胚,放入无菌的 100 cm2 培养皿。

4. 剪掉每个鸡胚的头和足,将剩余的身体放入无菌的 100 cm2 平皿中,加入 10 ml 无添加剂的 MEM 培养基。通过 10 ml 注射器(5 个鸡胚/注射器)挤压,将鸡胚切碎并***无菌的胰酶消化瓶中。

5. 加入 100 ml 37℃ 的胰酶/EDTA,并在加湿的 5% CO2 培养箱中 37℃ 持续搅拌温育 5 min。

6. 将液体从无菌胰酶消化瓶中倒人杯口带两层纱布的 500 ml 烧杯,将过滤后的液体转移至 250 ml 离心瓶中。

7. 向含有剩余组织的无菌胰酶消化瓶中加入 100 ml 新鲜的胰酶/EDTA,37℃ 温育。

8. 将消化液倒入另一个杯口带两层纱布的 500 ml 烧杯,并将过滤后的液体加入先前的 250 ml 离心瓶中。

9. 在 Sorvall RC-3B 离心机中,4℃,1200 g 离心 10 min。

10. 丢弃上清,加入 10 ml MEM-10 完全培养基,反复抽吸 10~15 次重悬沉淀,并将体积调整至 100 ml。

11. 将悬液转移至 250 ml 离心瓶中,4℃,1200 g 离心 10 min。

12. 用 5 ml MEM-10 完全培养基重悬沉淀,并将体积调整至 30 ml。

13. 将细胞悬液按每瓶 1 ml 加入到 30 个含有 30 ml MEM-10 完全培养基的 150 cm2 组织培养瓶中。

14. 37℃ 培养几天直至细胞长满,然后将培养瓶转移至加湿的 5% CO2 培养箱中 31℃ 保存。

CEF 细胞培养液能够在 31℃ 保存 2~3 个星期。原代

组织培养有哪些优点?

组织培养的优点:

(1)可保存种性:能保持原有品种的固有性状和特性。

(2)节约繁殖材料:采集一小部分营养器官就能繁殖出大量花苗。

(3)繁殖速度快:从优良母株上取一小块组织,在合适的条件下经过离体培养,一年内就能繁殖出成千上万株苗。

(4)节省土地:组培材料是放在三角瓶或试管内培养的,可以充分利用空间。通常一间30平方米的培养室就能摆放1万多个三角瓶,可以繁殖几万株苗,而且周转快,全年均可连续培养。

(5)去病毒:目前许多花卉病毒病较为严重,直接影响观赏和出口。通过组织培养可以进行脱毒,使之成为无毒苗。

(6)复壮品种:对于长期使用无性繁殖,并开始退化的花卉品种,采用组培方法繁殖,可使个体发育向年轻阶段转化。

(7)可进行无性繁殖:对一些生产上难以进行无性繁殖的花木,或者至今完全不能进行无性繁殖的花木,在组培的特殊条件下,可以在短期内获得大量营养苗。

到此,以上就是小编对于组织培养瓶的问题就介绍到这了,希望介绍关于组织培养瓶的2点解答对大家有用。

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最后编辑于:2023/10/31作者:xinfeng335

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