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原代培养跟传代培养的区别?
细胞原代培养和传代培养的区别原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
原代培养和传代培养的区别:原代培养的字面意思即第1次培养,但实际上,通常把第1代至第10代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。传代培养是第10代-第50代培养,这个时候是细胞株。
原代培养就是提取的细胞体外第一次培养,当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止,另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。
简述动植物细胞培养的特点与难点?
1)血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。有一天人们真正学会了配制和血清一样的培养液,那时血清才可被取代。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 (2)支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃, 高速冷冻离心机塑料等作为支持物。 (3)气体交换:二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节,不断维持所需要的气体条件,每一次开箱操作后的快速恢复对设备的要求可想而知有多难,由此决定了动物细胞离体培养设备要求高、投资大。 植物细胞培养的特殊条件 (1)光照:离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格,因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关,而且与细胞分化有关,例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用,所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中,光照条件特别重要。以植物细胞离体培养方式获得重要物质,如药物的过程,植物细胞大多是在反应器中悬浮培养。 (2)激素:植物细胞的分裂和生长特别需要植物激素的调节,促进生长的生长素和促进细胞分裂的分裂素是最基本的激素。植物细胞的分裂,生长,分化和个体生长周期都有相应的激素参与调节。和动物细胞相比,植物细胞离体培养对激素要求的原理已经了解,其应用技术也已相当成熟,已经有一套广泛作为商品使用的培养液。同时解决了植物细胞对水、营养物、激素、渗透压、酸碱度、微量元素等的需求。
植物细胞培养具有如下显著特点:
(1)提高产率:使用优良的植物细胞进行培养生产天然产物,可以明显提高天然产物的产率,例如,日本三井石油化学工业公司于1983年在世界上首次成功地采用紫草细胞培养23天。细胞中紫草宁的含量达到细胞干重的14%,比紫草根中紫草宁的含量高10倍,植物细胞培养生产紫草宁的比产率达到5.7mg/d*g细胞,比种植紫草宁比产率(0.0068mg/d*g植物)高830倍。
(2)缩短周期:植物细胞声场的倍增时间一般为12~60h,一般生产周期15~30d,这比起微生物来时相当长的时间,但是与完整植物的生长周期比较,却是大大地缩短生产周期。一般植物从发芽、生长到收获,短则几个月,长则数年甚至更长时间。例如,木瓜的生长周期一般为8个月,紫草为5年,野山参则更长。
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